HPLC液相色譜儀以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學、醫(yī)學、工業(yè)、農(nóng)學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用。
儀器采用了先進的硬件和軟件設計理念,具備高效、快速、超高分離效果等特色。
HPLC液相色譜儀又儲液瓶,送液裝置(泵),進樣裝置,色譜柱,檢測器,工作站組成!
下面是按照流動相走的順序說下吧:
儲液瓶:裝流動相。
送液裝置(泵):送液的。
進樣裝置(手動/自動進樣):使樣品進入系統(tǒng)中。
色譜柱:分離的核心,色譜的心臟,分離的好壞絕大部分取決于色譜柱的選擇。
檢測器:收集信號變化,記錄數(shù)據(jù)變化。
工作站:早期的是積分儀,現(xiàn)在基本淘汰,現(xiàn)在一般都是將模擬信號或數(shù)字信號的,模擬信號需要轉換成數(shù)字信號傳給電腦,電腦上有軟件,進行數(shù)據(jù)的記錄和處理。
1、所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
2、壓力不能太大,不要超過2000psi。
3、流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
4、柱子是非常脆弱的,*次做的方法,先不要讓液體過柱子。
5、選擇高品質的柱子,并注意使用方法;可以延長柱子的使用壽命。一般認為同一廠牌、同一型號的柱子之間的品質都相同,對品質管理很嚴格的廠家而言,這說法是成立的。但如果廠家品質管理不夠嚴格,即使是同一批號的新柱子之間的品質也有差異。所以,選用柱子時必須選擇管理嚴格的高品質柱子,我們知道,任何柱子使用過后都會產(chǎn)生變化。尤其如在強酸或強堿條件下使用,柱子更易產(chǎn)生變化。因此,應盡量選用pH適用范圍大的柱子。在開發(fā)新分析方法時,許多專家建議不要使用舊柱子。因柱子一經(jīng)使用。柱性會改變;如此一來,使用舊柱子開發(fā)出來的新分析方法,很可能在再使用同廠牌的新柱子分析時。發(fā)生無法達到預定效果的情況。